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差速離心概述

差速離心是一種離心過程,其中通過施加一系列增加的離心力將組分分別沉降到離心管中。

差速離心原理

  • 差異離心是基于不同大小和密度的生物顆粒沉降速率的差異。
  • 當(dāng)施加增加的離心力時,較大分子的初始沉淀發(fā)生。
  • 取決于單獨(dú)離心步驟的速度和時間以及顆粒的密度和相對尺寸,其他顆粒沉降下來。
  • zui大種類的顆粒在離心管底部形成沉淀,在上清液中留下較小尺寸的結(jié)構(gòu)。
  • 因此,較大的分子以較低的離心力快速沉降,而較小的分子則需要較長的時間和較高的力。
  • 如果顆粒的密度小于介質(zhì)密度,則顆粒將漂浮而不是沉降。

差速離心的步驟

  • 將樣品溶液在含有緩沖液的培養(yǎng)基中勻漿。
  • 然后將樣品放入離心管中,該離心管在特定溫度下以特定離心力運(yùn)行特定時間。
  • 在該操作結(jié)束時,將在管的底部形成沉淀,將其與上清液分離。
  • 將上清液添加到新的離心管中,在該離心管中以另一種速度離心特定的時間和溫度。
  • 再次,將上清液與形成的沉淀分離。
  • 繼續(xù)這些步驟,直到所有顆粒彼此分離。
  • 然后可以通過測試特定顆粒**的指示劑來識別顆粒。

差速離心的用途

  • 差速離心通常用于分離細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞器和細(xì)胞膜。
  • 它還可以用于核的低分辨率分離。
  • 由于此技術(shù)可根據(jù)顆粒大小分離顆粒,因此可用于純化含有較大尺寸雜質(zhì)的提取物。